如何使用流式细胞instrument分析细胞存活率、细胞周期和ROS?流式细胞分析指使用流式细胞instrument分析。[求助] 流式 细胞仪器检测细胞细胞凋亡的结果怎么办分析 Done 流式,但是看到结果不知道怎么办流式-1染色的细胞以悬浮的单线流过高强度光源的焦点,当每个细胞通过焦点时,它发出一束散射光和/或荧光。
我简单说一下:\x0d\x0a1。先用机器吸细胞悬液,注入鞘液(一般是磷酸盐缓冲液)。由于鞘液流速高,细胞悬液以轴向流动的形式处于中心,一般以单细胞队列的形式出现。\x0d\x0a\x0d\x0a2。然后细胞通过检测窗口。有激光束照射。细胞一般是荧光染色,经激光照射后,会产生不同波长的激发光。流式 细胞仪器主要由流动室和液流系统、激光源和光学系统、光电管和检测系统、计算机和分析系统四部分组成。
检测时,将细胞或待测颗粒制成细胞悬液,荧光染色后加入样品管中。待测样品在一定压力下被压入流动室,磷酸盐缓冲液(鞘液)在高压下从鞘液管中喷出,鞘液管的布居方向与待测样品流成一定角度,使鞘液高速绕样品流动,形成环流(鞘流), 待测样品在鞘液包下排成单行依次通过检测区。 流式 细胞仪器通常使用激光作为光源。
假设这个图前面的所有步骤都是正确的,包括设置gate,以及single 细胞的gate等等。这两幅图没有可比性。第一个图表记录了10,000多个数据,而第二个图表只记录了2,000多个数据。远非如此。这是最大的错误。从现有的百分比来看,G1和G2的百分比也非常接近。所以你看不出区别。你要做的就是看你的实验方法是否已经细胞循环。做这个实验是不可能的。必须做BrdU或EdU加PI双重染色实验。
请参考这两个文档。它们都使用相同的荧光探针:j biochem biophysics . 2005 sep 30;64(3):20715.2 nbdgasafluorescendicatorfordirectgluceutakeemeasurement . diabetestechnolther . 2011 jul;13(7):743–751.一种测量葡萄糖转运蛋白的荧光方法.